Miután a sejteket tenyésztjük

cellagyárszennyezettek, legtöbbjük nehezen kezelhető.Ha a szennyezett sejtek értékesek és nehezen beszerezhetőek, az alábbi módszerekkel távolítható el.

1. Használjon antibiotikumot

Az antibiotikumok hatékonyabbak a baktériumok elpusztításábansejtgyárak.A kombinált gyógyszeres kezelés hatékonyabb, mint az egyedüli gyógyszeres kezelés.A megelőző gyógyszeres kezelés hatékonyabb, mint a fertőzés utáni gyógyszeres kezelés.A megelőző gyógyszeres kezelés általában kettős antibiotikumot használ (penicillin 100 u/ml plusz sztreptomicin 100 μg/ml).Szennyezés után a tisztítási módszernek 5-10-szer nagyobbnak kell lennie, mint a szokásos mennyiség.A gyógyszert az adagolás után 24-48 óráig kell alkalmazni, majd a szokásos rutinnal kell helyettesíteni.Kultúra folyadék.Ez a módszer hatékony lehet a fertőzés korai szakaszában.A penicillin és a sztreptomicin mellett a felhasznált antibiotikumok közé tartozik a gentamicin, kanamicin, polimixin, tetraciklin, nystatin stb. is. Általában 400-800 μg/ml kanamicint vagy 200 μg/ml tetraciklint használnak.A táptalajt 2-3 naponta cserélik, és 1-2 generáción keresztül továbbadják kezelés céljából.Az elmúlt években arról számoltak be, hogy a 4-fluor, 2-hidroxi-kinolin (Ciprofloxacin, Cip), Pleu-romutilin származék (Pleu-romutilin származék, BM-Cyclin2: BM-1 és tetraciklin származék (BM-2)) Az antibiotikumok önmagában vagy kombinációban alkalmazva hatékony a mikoplazma elpusztításában.Ezt a három antibiotikumot 250-szeres koncentrációjú PBS-oldattá készítik, és -20 °C-on tárolják későbbi felhasználásra.A Cip felhasználási koncentrációja 10 μg/mL, a BM-1 10 μg/mL, és a BM-2 5 μg/ml.Használatkor először szívja le a szennyezett táptalajt, adjon hozzá BM-1-et tartalmazó RPMI1640 táptalajt, majd 3 nap múlva szívja le a táptalajt, adjon hozzá BM-2-t tartalmazó RPMI1640 táptalajt, és tenyésztse 4 napig, és így tovább 3 egymást követő napon. .körben, amíg 33258-as fluoreszcens festési mikroszkóppal be nem igazolják, hogy a mikoplazma elpusztult, majd normál táptalajt adunk a tenyésztéshez és passzáláshoz 3-4 alkalommal.

2. Fűtéskezelés

A szennyezett szövettenyészet 41 °C-on 18 órán keresztül történő inkubálása elpusztíthatja a mikoplazmát, de káros hatással van a sejtekre.Ezért a kezelés előtt előzetes tesztet kell végezni, hogy feltárják azt a melegítési időt, amely a lehető legnagyobb mértékben képes elpusztítani a mikoplazmát, és a legkisebb hatással van a sejtekre.Ez a módszer néha megbízhatatlan.Ha először gyógyszerekkel kezeljük, majd 41°C-ra melegítjük, a hatás jobb lesz.

3. Használjon mycoplasma-specifikus szérumot

A mycoplasma szennyeződés 5%-os nyúl mycoplasma immunszérummal (hemagglutinációs titer 1:320 vagy magasabb) távolítható el.Mivel a specifikus antitest gátolhatja a mikoplazma növekedését, az antiszérum kezelés után 11 nappal negatívvá válik, és 5 hónappal később is negatív marad.negatív.Ez a módszer azonban problémásabb, és nem olyan kényelmes és gazdaságos, mint az antibiotikumok alkalmazása.

4. Egyéb módszerek

A fent említett szennyeződés eltávolítási módszereken kívül léteznek még állatokon végzett oltási és sterilizálási módszerek, makrofág fagocitózisos módszerek, módszerek bromouracil hozzáadására a szennyezett anyagokhoz.kultúrpalackokmajd besugározzuk őket fénnyel, és szűrési módszerekkel stb., de ezek mind nagyobb gondot okoznak és hatástalanabbak.Ezért, ha a mikoplazma-szennyeződés megtörténik, általában eldobják és újratenyésztik, hacsak az nem különösen fontos.

kérjük lépjen kapcsolatba a Whatsapp & Wechattel: +86 180 8048 1709